hrvatski

Učinak kratkotrajne dijete s povećanim udjelom NaCl na zastupljenost Th17 i Treg limfocita u perifernoj krvi zdravih mladih ispitanika

Cilj istraživanja: Odrediti zastupljenost Th17 i Treg limfocita u perifernoj krvi zdravih mladih ispitanika prije i nakon sedmodnevne dijete s povećanim udjelom kuhinjske soli. Nacrt studije: Studija je ustrojena kao nerandomizirani kontrolirani pokus u kojem su svi ispitanici bili podvrgnuti istom eksperimentalnom protokolu s više ponovljenih mjerenja. Ispitanici i metode: U istraživanju su sudjelovali zdravi mladi dobrovoljci oba spola (10 žena i 10 muškaraca). Istraživanje je trajalo 14 dana te je bilo podijeljeno na 7- dnevno razdoblje niskog (NSD) i 7-dnevno razdoblje visokog unosa (VSD) kuhinjske soli. U prvom dijelu istraživanja ispitanici su konzumirali 3, 5 g soli, a drugom 14 g soli dnevno. 7. i 14. dan protokola ispitanicima je uzorkovana periferna venska krv iz koje su na gradijentu fikola izolirane mononuklearne stanice (Ficoll® Paque Plus Cytiva, GE He17- 1440-02). Stanice su potom pohranjene na - 80 °C do analize. Za odmrzavanje uzoraka koristio se RPMI-1640 stanični medij uz dodatak FBS-a i antibiotika. Neposredno nakon odmrzavanja dio stnica je korišten za imunofenotipizaciju Treg (CD3+CD4+CD25+Foxp3+) stanica dok su iz preostalog uzorka izdvojeni ukupni CD4+ pomoćnički T limfociti (Th) metodom magnetskog sortiranja pomoću komercijalno dostupnog seta (MagniSortTM Human CD4+ T cell Enrichment kit). Za poliklonsku aktivaciju Th stanica korišten je komercijalni set koji sadrži PMA (forbol 12- miristat 13-acetat) i ionomicin (eBioscienceTM Cell Stimulation Cocktail). Naposljetku je slijedila imunofenotipizacija Th17 limfocita (CD3+CD4+IL-17+) pomoću BD FACS Canto II citometra. Za statističku analizu korišten je statistički program Graph Pad Prism v6.01 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Rezultati: Nije bilo značajne promjene u perifernim udjelima Treg i Th17 stanica nakon 7-dnevne VSD u odnosu na NSD. Zaključak: Kratkotrajna dijeta s povećanim udjelom kuhinjske soli ne utječe na zastupljenost Th17 i Treg limfocita u perifernoj krvi zdravih mladih ispitanika.

Th17 stanice ; regulatorni T limfociti ; natrijev klorid

nije evidentirano