hrvatski

Epigenetske promjene i ekspresija proteina PTCH1, SHh i IHh u seroznim karcinomima jajnika

Serozni karcinomi jajnika najčešći su oblik epitelnih tumora jajnika. Uglavnom se dijagnosticiraju u uznapredovalom stadiju bolesti i imaju visoku stopu smrtnosti. Kod raka jajnika primijećena je poremećena aktivacija više signalnih puteva među kojima je i signalni put Hedgehog (Hh). Uloga signalnog puta Hh u raku jajnika, kao i u pojedinim histološkim podtipovima raka jajnika, nije dovoljno istražena. U ovoj disertaciji istražili smo ulogu proteina PTCH1, SHh i IHh, kao i promjene u metilacijskom statusu promotora istoimenih gena, u seroznim karcinomima jajnika. Istraživanje je provedeno na uzorcima seroznih karcinoma jajnika niskog (LGSC) i visokog (HGSC) stupnja malignosti, dok su uzorci zdravih jajnika i jajovoda služili kao kontrole. U istraživanju su korištene i stanične linije HGSC- a, OVCAR5, OVCAR8 i OVSHAO, i kontrolna stanična linija normalnih epitelnih stanica jajovoda, FNE1. Ekspresija proteina PTCH1, SHh i IHh u tkivnim uzorcima analizirana je metodom imunohistokemije, dok je u staničnim linijama ispitana uz pomoć imunofluorescencije i Western blota. Metilacijski obrazac DNA u promotorima gena PTCH1, SHh i IHh analizirali smo koristeći PCR ovisan o metilaciji (MSP). Ekspresija proteina PTCH1, SHh i IHh bila je značajno veća u karcinomima HGSC i LGSC u odnosu na kontrolna tkiva, kao i u karcinomskim u odnosu na kontrolnu staničnu liniju. U tumorskom tkivu i tumorskim stanicama u kulturi bila je izražena nuklearna ekspresija proteina PTCH1 što navodi na zaključak da bi navedeni protein mogao igrati aktivnu, tumor-promotorsku ulogu u jezgri malignih stanica seroznih karcinoma jajnika. U staničnim linijama detektirani su fragmenti proteina PTCH1 različite molekularne mase što upućuje na mogućnost proteolitičkog cijepanja ovog proteina. Autokrina signalizacija ovisna o SHh- ligandu utvrđena je u karcinomima HGSC i LGSC, dok su autokrina i parakrina signalizacija ovisna o IHh-ligandu uočene u karcinomima HGSC. Metilacija DNA u promotorima gena PTCH1, SHh i IHh nije bila povezana s razinom ekspresije ovih proteina što navodi na zaključak da ovaj mehanizam nije uključen u patogenezu seroznih karcinoma jajnika. Dobiveni rezultati upućuju na aktivnu ulogu proteina PTCH1, SHh i IHh u patogenezi seroznih karcinoma jajnika te doprinose boljem razumijevanju molekularne patogeneze ovih karcinoma.

erozni karcinomi jajnika ; signalni put Hedgehog ; PTCH1 ; SHh ; IHh ; metilacija DNA

nije evidentirano