hrvatski

Usporedba i odabir prikladne metode za djelotvornu analizu autofagije u staničnim uzorcima

Usporediti tri osnovna principa bojanja autofagnih vakuola. Nakon pripreme uzoraka i bojanja, analizom rezultata odrediti koja od metoda je najprikladnija za detekciju autofagije u našim uvjetima rada. Materijal i metode: Uzorci HeLa stanične linije (1 – 3 x 105 stamica po jažici), inkubirane u 24h, 48h, i 72h u tri različita medija obojani su po protokolima za bojanje. Rezultati su analizirani na protočnom citometru. Rezultati: Bojanje MDC-om i komercijalnim kitom za detekciju autofagije ne daje vidljivu razliku u rezultatima zbog neoptimalnih postavki lasera ili smanjene fluorescencije. Najbolje rezultate, s najvidljivijom razlikom, daje bojanje AO-m. Zaključak: Bojanje autofagnih vakuola je relativno su brza i jednostavna metoda praćenja autofagije. Najbolje rezultate daje bojanje AO-m. Metode bojanja nisu dostatne samostalno i potrebno je paralelno provoditi još nekoliko metoda za detekciju autofagije kako bi se mogli donijeti čvrsti i točni zaključci o autofagiji u odabranim uzorcima.

autofagija ; autolizosomi ; bojanje ; MDC ; AO ; stanična kultura ; protočna citometrija

nije evidentirano