hrvatski

Kloniranje sekvenci za miR-7 i miR-34a i njihova ekspresija u glioblastomskoj staničnoj liniji

Male nekodirajuće RNA mikroRNA (miRNA, miR) reguliraju proteinsku ekspresiju i sudjeluju u brojnim staničnim procesima. miR-7 i miR-34a se smatraju tumorskim supresorima, budući da njihova ekspresija inhibira staničnu proliferaciju, potiče apoptozu i povećava osjetljivost na kemoterapeutike. Cilj ovog rada je istraživanje utjecaja miRNA na proliferaciju i preživljenje stanične linije glioblastoma A1235. Metode su obuhvatile konstrukciju ekspresijskih plazmida sa sekvencama pri-miRNA- 7 i pri-miRNA-34a, uzgoj staničnih klonova transfekcijom plazmida sa sekvencama miR, te detekciju zrelih miR procesom koji je uključivao reverznu transkripciju i umnažanje metodom kvantitativnog PCR u stvarnom vremenu. Otpornost na kemoterapeutik istražena je praćenjem proliferacije sojeva s povećanom ekspresijom miR-7 i miR-34a u prisustvu alkilirajućeg agensa. Rezultati su pokazali povećanje ekspresije zrelih miR-7 i miR-34a u stanicama nakon unosa plazmida s njihovim sekvencama. Međutim, nije bilo morfoloških niti bitnih razlika u brzini proliferacije stanica i otpornosti na alkilirajući agens kod stanica s povećanom ekspresijom miRNA u odnosu na kontrolne stanice. Rezultati ukazuju na moguće stanično-specifične uloge miR-7 i miR-34a ovisne o unutarstaničnoj signalnoj mreži.

miR - 7 ; miR - 34a ; ekspresija ; glioblastomska stanična linija

nije evidentirano