engleski

Determination of virus potency in cell culture using fluorescent mumps virus

Virus mumpsa uzrokuje istoimenu bolest ljudi koja se prevenira cijepljenjem. Poznavanje titra virusa važan je parametar za njegovu karakterizaciju u virologiji i vakcinologiji. Najčešće se koriste test plakiranja, temeljen na citopatogenom efektu u obliku plakova, i test 50% infektivne doze stanične kulture (CCID50), temeljen na detektiranju citopatogenog efekta u 50% inokuliranih stanica. U ovom istraživanju korišten je rekombinantni virus mumpsa MRV3, priređen iz soja L-Zagreb s ugrađenim genom za zeleni fluorescentni protein koji uzrokuje fluorescenciju inficiranih stanica. Očitavanje ovih testova standardno se radi makroskopski ili svjetlosnim mikroskopom, a rezultati ovise o objektivnosti i iskustvu operatera. Vrijednosti titra u ova dva testa razlikuju se za iste sojeve mumpsa, a za konverziju vrijednosti iz testa CCID50 u vrijednosti iz testa plakiranja ne postoji jedinstveni konverzijski koeficijent. Cilj istraživanja je bio očitati titar u oba testa standardnim načinom te fluorescencijskom mikroskopijom, usporediti rezultate, definirati utjecaj načina očitavanja na rezultat testa te odrediti eksperimentalni konverzijski koeficijent za MRV3. Upotrebom fluorescencije u očitavanju testa plakiranja utvrđeno je postojanje makroskopski nevidljivih plakova, što je dalo razliku vrijednosti titra za 0.4 log. Na očitavanje testova CCID50 upotreba fluorescencije utjecala je neznatno. Eksperimentalni konverzijski koeficijenti za uzorke virusa MRV3 bili su u rasponu 0.04-0.15.

mumps, fluorescence, titre, plaque assay, CCID50, conversion coefficient

nije evidentirano