hrvatski

Utjecaj mistranslacije na stabilnost modelnih proteina u staničnom ekstraktu

Izoleucil-tRNA-sintetaza (IleRS) katalizira sintezu Ile-tRNA(Ile) u procesu biosinteze proteina. IleRS može ponekad griješiti i misacilirati tRNA(Ile) s valinom ili neproteinogenim norvalinom. Pogreška u biosintezi proteina (mistranslacija) može biti štetna za stanicu. Iz tog razloga, IleRS posjeduje domenu za popravak vlastite pogreške. U okviru ovog rada praćena je promjena temperature mekšanja β-galaktozidaze kao modelnog proteina uslijed zamjene izoleucina s valinom ili norvalinom. Termička stabilnost β- galaktozidaze praćena je u staničnim ekstraktima soja bakterije Escherichia coli koji ima inaktiviranu domenu za popravak pogreške IleRS te ugrađuje valin i norvalin na izoleucinske položaje. Pokazano je da mistranslacija izoleucinskih položaja β- galaktozidaze objema nepripadnim aminokiselinama smanjuje termičku stabilnost enzima te da je utjecaj norvalina izraženiji. Nadalje, opažena je značajnija inhibicija rasta bakterijskih stanica uslijed zamjene izoleucina norvalinom u odnosu na valin. Rezultati sugeriraju da veća toksičnost mistranslacije norvalinom barem djelomično potječe od smanjene stabilnosti proteina s ugrađenim norvalinom.

izoleucil-tRNA-sintetaza ; norvalin ; mistranslacija ; mistranslatirani proteini ; temperatura mekšanja

nije evidentirano