hrvatski

Određivanje interakcije bakrovih iona i proteina CrdA iz bakterije Helicobacter pylori

Proučavan je protein CrdA humanog patogena bakterije Helicobacter pylori. Smatra se da protein CrdA sudjeluje u transportu iona bakra. U svrhu ispitivanja mehanizma regulacije iona bakra u H. pylori i dobivanja proteina CrdA provedena je prekomjerna ekspresija dva fuzijska proteina SUMO-G-CrdA i GST-CrdA u bakteriji Escherichia coli. Provedena su pročišćavanja fuzijskih i porezanih proteina pomoću afinitetne kromatografije, gel- filtracije i ionsko- izmjenjivačke kromatografije. Optimizirane su metode rezanja i pročišćavanja u svrhu dobivanja što čišćih uzoraka proteina CrdA. Ispitana je stabilnost fuzijskog proteina SUMO- GCrdA mjerenjem temperature denaturacije proteina pri različitim uvjetima kao i DLS metodom. Ustanovljeno je da je najveća stabilnost fuzijskog proteina u otopini koja sadrži Cu2+ ione što bi moglo upućivati na stvaranje interakcije između proteina CrdA i Cu2+ iona. Ispitivanjem interakcije proteina CrdA i Cu2+ iona mikrotermoforezom određena je konstanta disocijacije kompleksa CrdA:Cu2+ koja iznosi 7, 98 (± 1, 94) mikromol dm-3 .

bakar, CrdA, Helicobacter pylori, humani patogen, mikrotermoforeza

nije evidentirano