hrvatski

Utjecaj razine progesterona u serumu prije i nakon sinkronizacije umjetnoga osjemenjivanja na plodnost mliječnih krava izloženih toplinskomu stresu

Temperatura okoliša iznad termoneutralne zone (16-25 oC) u kombinaciji s povećanom vlažnosti zraka mogu dovesti do toplinskog stresa u mliječnih krava, s tim da utječu na općenito zdravlje, njihovu produkciju te reproduktivne pokazatelje. Tijekom ljeta, dolazi do subfertilnosti krava, vjerojatno uslijed poremećaja gonadotropne sekrecije, steroidogeneze, narušenog mehanizma ovulacije i formiranja žutog tijela te usporenog razvoja zametaka. Evidentno je da se u uvjetima toplinskog stresa znaci estrusa slabije ispoljavaju te da je postotak oplodnje drastično umanjen. Postoje oprečna mišljenja od točnim mehanizmima nastajanja ovih poremećaja te načina sprečavanja i nadvladavanja istih. Naše su pretpostavke da je jedan od važnijih čimbenika ovoga stanja, sublutealna koncentracija progesterona, koja je izražena u ljetnim mjesecima. Zbog toga je cilj našeg istraživanja bio osigurati optimalnu razinu progesterona u serumu krava, primjenom dva pristupa: - Tretman gonadotropnim releasing hormonom (GnRH) nakon osjemenjivanja. - Dodavanjem egzogenog progesterona aplikacijom PRID-a (engl. Progesterone-Releasing Intravaginal Device) prije umjetnog osjemenjivanja (UO). Pokusi su provedeni na jednoj farmi mliječnih krava u Bitolju, R. S. Makedonija tijekom ljeta (srpanj-rujan 2018.). Na kravama Holstein pasmine (n=161), držane slobodno u prostorijama poluotvorenog sistema, na strojnoj mužnji i hranjene TMR-om (engl. Total Mixed Ration), bila su napravljena istodobno dva odvojena pokusa. U prvom pokusu – tretman s GnRH-om (n=95) uključene su bile dvije skupine, pokusna (n=50) je tretirana s 100 μg GnRH 5. dana nakon UO te kontrolna (n=45), bez dodatnog tretmana. Krave su pregledane ultrazvukom na dan prve PGF2α injekcije, kao i 5-og, 14-og i 21-og dana nakon UO, kako bi se ustvrdilo prisustvo jednog ili više žutih tijela (d 5) kao i dodatnog (akcesornog) žutog tijela (d 14) pomoću B-mode skenera Mindray DP 50, s rektalnom sondom od 7, 5 MHz. U istim danima uzimani su krvni uzorci za ispitivanje serumskog P4. Drugi pokus – 7- dnevni tretman krava egzogenim progesteronom pomoću PRID Delta, počevši također 5 dana nakon sinkroniziranog estrusa (n=48), a krave su podijeljene u dvije skupine: PRID (n=27) i kontrolna skupina (n=21). Prije toga sve jedinke su bile pre-sinkronizirane pomoću PG-3-G protokola, i umjetno osjemenjene u fertilnom estrusu. Ultrazvučna dijagnostika graviditeta za oba pokusa napravljena je 21-og i 30-og dana nakon UO, pomoću B-mode skenera Mindray DP 50, (Soma Technology Inc. SAD), s linearnom rektalnom sondom od 7, 5 MHz. Analiza serumskog P4 učinjena je pomoću kitova (HUMAN, Progesterone ELISA Test - Njemačka) na Imuno-scan BDLS čitaču. Intra- i inter-assay CV bili su 7, 2 % i 8, 6 %. Rezultati su pokazali da u prvom pokusu, 5. dana nakon UO, nisu uočene razlike u broju žotih tijela (CL) prisutnih na jajnicima u obje skupine krava te da se koncentracija P4 nije razlikovala između skupine GnRH i kontrolne skupine (CON) (1, 67 ± 0, 59 ng/mL i 1, 54 ± 0, 52 ng/mL, P<0, 05). Tretman s GnRH 5. dana nakon UO značajno je povećao postotak krava s 2 x CL na d 14, pri čemu je više krava imalo 2 x CL u skupini GnRH u usporedbi s kontrolnom skupinom (CON) (82 % u odnosu na 0 %). Krave koje su ovulirale nakon aplikacije GnRH (2 CL u 14. dana) imale su značajno veće koncentracije P4 na d 14 (5, 87 ± 2, 04 ng/mL) u usporedbi s kravama CON (4, 21±1, 22 ng/mL) i kravama GnRH koje nisu ovulirale (3, 21 ± 1, 12 ng/mL). 21-og dana, veći postotak krava u skupini s GnRH dijagnosticiran je graviditet u usporedbi s CON skupinom (65 % u odnosnu na 48, 3 %, P<0, 05), no postotak se smanjio 30-og dana na 61 % u skupini GnRH i 37, 7 % u CON skupini, zbog ranog embrionalnog uginuća. U drugom pokusu smo također imali povećanje postotka u krava tretiranih PRID progestagenskim implantantima. Na dan 21 nakon vremenski planiranog umjetnog osjemenjivanja (engl. timed artificial insemination ; TAI), predviđeno je da će za više krava s PRID-om biti gravidne (16/27 ili 59, 25 %) u usporedbi s kontrolnom skupinom (11/21 ili 52, 38 %). Slično tome, 30 dana nakon TAI-a, više krava s PRID-om dijagnosticirane su kao gravidne (13/27 ili 48, 14 %) u usporedbi s CON skupinom (8/21 ili 38, 08 %). Evidentno je da su sve krave iz oba tretmana bile u ciklusu na temelju koncentracije P4 (P4>1 ng/mL) kod PRE-PG i G1. Koncentracije P4 u G1 razlikovale su se (P=0, 004) između PRID i CON grupa (1, 84 ± 0, 99 i 2, 97 ± 1, 82 ng/mL). Nasuprot tome, PRID skupina krava imala je tendenciju (P=0, 09) povećane koncentracije P4 na PGF2 u usporedbi s CON skupinom (4, 26 ± 1, 68 i 3, 74 ± 2, 39 ng/mL). Osim toga, pokazalo se da je više krava iz PRID skupine podvrgnuto kompletnoj luteolizi u usporedbi s CON skupinom (P4 koncentracija 0, 06 ± 0, 03 ng/mL u odnosu na 1, 28 ± 2, 41 ng/mL, respektivno). Može se zaključiti da GnRH tretman 5-og dana nakon UO prouzroči porast razine P4 stvaranjem dodatnog žutog tijela, čime utječe na postotak koncepcije po UO te može smanjiti rane embrionalne gubitke. Aplikacija egzogenog P4 prije UO-a može također povećati reproduktivnu učinkovitost krava u uvjetima toplinskoga stresa.

toplinski stres ; progesteron ; PRID ; GnRH ; mliječne krave ; stupanj koncepcije

nije evidentirano