hrvatski

Mikrosatelitna nestabilnost i gubitak heterozigotnosti u oboljelih od kronične mijeloične leukemije

UVOD: Kronična mijeloična leukemija (CML) je karcinom koštane srži koji obilježava pojava Philadelphia kromosomoma (Ph), postupni razvoj i nakupljanje abnormalnih leukocita i njihovih prekursora, te simptomi umora, visoke temperature i splenomegalije.. Pored kromosomske translokacije t(9 ; 22), pri evoluciji CML nastaju druge manje učestale kromosomske mutacije koje se potencijalno mogu detektirati analizom kratkih tandemskih ponavljanja (STR). Mikrosatelitna nestabilnost (MSI) i gubitak heterozigotnosti (LOH) povezani su s različitim bolestima, ali povezanost s CML-om slabo je istražena. CILJ: Ispitati učestalost i povezanost MSI i LOH 15 autosomalnih STR lokusa sa demografskim te kliničkim obilježjima oboljelih od CML-a. ISPITANICI I METODE: Skupljeni su uzorci bukalne sluznice i periferne krvi 18 CML i 10 kontrolnih ispitanika. Izolacija perifernih polimorfonuklearnih i mononuklearnih leukocitnih populacija iz krvi napravljena je pomoću Lymphoprep medija, a primjenom QIAamp DNA Blood Midi kompleta izolirana je DNA. Izolacija DNA iz uzoraka bukalne sluznice napravljena je primjenom InstaGene Matrix reagensa. Koncentracije DNA izolata izmjerene su na Qubit fluorometru pomoću Qubit Broad Range DNA kompleta. Amplifikacija i analiza duljine 15 STR lokusa provedena je multipleks PCR metodom i kapilarnom elektroforezom pomoću AmpFLSTR Identifiler Plus PCR Amplification kompleta. REZULTATI: Molekularno, 77, 8% CML pacijenata je MSI-negativno, a 22, 2% se pokazalo MSI- pozitivno. Najveći broj MSI događaja zabilježen unutar D8S1179, D3S1358 i D5S818 lokusa. ZAKLJUČAK: Iako je zabilježena razlika MSI zahvaćenih lokusa između CML i kontrolnih ispitanika, prisutnost MSI nije vezana uz dubinu molekularnog odgovora te druga klinička i demografska obilježja.

DNA ; kratka tandemska ponavljanja ; leukemija, mijelogena, kronična, BCR-ABL pozitivna ; leukociti

nije evidentirano