hrvatski

Interakcije između proteina Itch, p63/p73 i mutiranog p53 u tumorskim

Tumor-supresorski gen TP53 mutiran je u više od 50% tumora čovjeka. Zbog promjena u konformaciji, mutirani protein p53mut veže se za p53 divljeg tipa te p63 i p73, članove porodice p53 i tako ih inaktivira. Nisku razinu proteina p63 i p73 u stanicama održava ubikvitinska ligaza ITCH koja omogućuje njihovu razgradnju putem proteasoma. Metodom koimunoprecipitacije i analizom metodom Western blot određivala sam interakcije između proteina ITCH, p63/p73 i p53mut u tumorskim stanicama. Potvrdila sam da dolazi do stvaranja interakcija između egzogenog ITCH (divljeg tipa i ITCHmut) i izoformi TAp63α, ΔNp63α, TAp73β i ΔNp73α u stanicama koje ne eksprimiraju p53 kao i u stanicama koje eksprimiraju p53mut (p53R248W). Plazmidne vektore s ugrađenim genima za TAp63α, ΔNp63α, TAp73β i ΔNp73α kotransfecirala sam s vektorom za ITCHmut u stanice koje eksprimiraju p53R248W kako bih utvrdila utječe li ubikvitinska ligaza ITCH na stvaranje heterokompleksa između p53mut i drugih članova porodice p53. Pokazala sam da ITCHmut ne utječe na stvaranje heterokompleksa između p53mut i izoformi TAp63α, ΔNp63α i TAp73β, dok je intenzitet vezanja za ΔNp73α bio jači u prisutnosti ITCHmut. Iako je ITCH glavni regulator razine p63 i p73 u stanicama, moguće je da ima zanemarivo djelovanje na interakcije između p53mut i p63/p73.

proteinske interakcije ; mutirani p53 ; p63 ; p73 ; ITCH

nije evidentirano