hrvatski

Apoptotičko djelovanje određenih biološki aktivnih spojeva na TCCSUP staničnu liniju karcinoma mokraćnog mjehura

Cilj ovog završnog rada bio je ustanoviti apoptozu induciranjem pomoću određenih spojeva (timokinon, farnezol, nerolidol, tujopsen i fitol) na TCCSUP staničnu liniju humanog karcinoma mokraćnog mjehura pomoću protočne citometrije. Apoptoza ili programirana smrt stanice je jako važan fiziološki proces u očuvanju homeostaze. Istraživanja apoptoze su veoma popularna u opisivanju djelovaja mnogih biološki aktivnih spojeva . Danas postoje mnoge različite analitičke metode i tehnike kojima se koriste znanstvenici za praćenje svakog koraka apoptoze, to su na primjer, protočna citometrija, fluorescentna mikroskopija i ostali. Rad se sadrži od eksperimentalnog dijela u kojem se korištena stanična linija raka mokraćnog mjehura tretira s otopinama odabranihspojeva. Nadalje stanice su se bojale specifičnim fluorokromima. Primarno bojilo je antikoagulacijski Ca2+-ovisan protein Aneksin V konjugiran sa fluorescein izotiocijanatom. Taj se konjugat, reverzibilno veže za fosfatidilserin, koji je translociran sa unutarnjeg sloja na vanjski sloj stanične membrane i tako daje zelenu fluorescenciju. U kasnoj apoptozi, stanična membrana postane propusna za sekundarno bojilo propidij-jodid koji se veže za DNA, dajući crvenu fluorescenciju. Nakon toga, protočna citometrija se koristi za svaki uzorak da se odredi koliko je stanica živo, u apoptotozi i/ili nekrotično.

apoptoza ; TCCSUP ; protočna citometrija ; tumor mokraćnog mjehura ; timokinon ; farnezol

nije evidentirano