hrvatski

Izolacija lipidnih splavi prije i nakon procesa mijelinizacije u mozgu divljeg tipa miša C57Bl6

Uvod: Mijelin je izolacijska membrana koja je koncentrično omotana oko aksona. Ona sadrži tri vrste proteina: glikoprotein vezan za mijelin (MAG), bazični mijelinski protein (MBP) i proteolipidni protein (PLP) te lipide i kolesterol. Lipidi se nalaze u lokaliziranim regijama koje se nazivaju lipidne splavi. Glavne molekule koje izgrađuju lipidne splavi su kolesterol, sfingomijelin i glikosfingolipidi, posebice gangliozidi. Gangliozidi osiguravaju pravilnu funkciju lipidnih splavi te im se povećava koncentracija starenjem mozga. Marker splavi je flotilin, a nesplavi transferin. Ciljevi: Izolirati lipidne splavi iz mozgova miševa divljeg tipa (engl. wild type, WT) C57BI6 prije (5 dana starosti), tijekom (15 dana starosti) i nakon završenog procesa mijelinizacije (30 dana starosti) te utvrditi kako se pojavljuju markeri mijelina u lipidnim splavima. Materijali i metode: U istraživanju su korišteni uzorci moždanog tkiva divljeg tipa miša C57BI6 različite starosti (5 dana, 15 dana i 30 dana starosti). Nakon potvrde genotipa životinje su žrtvovane, a uzorci mozgova su smrznuti u tekućem dušiku. Iz smrznutih uzoraka izolirano je moždano deblo te je provedena izolacija lipidnih splavi ultracentrifugiranjem u gradijentu saharoze. Sastav dobivenih frakcija odredio se Western blot metodom korištenjem markera splavi i nesplavi te markera mijelina MAG i MBP. Rezultati su analizirani u računalnom programu Fiji i IBM SPSS Statistics v22. Rezultati: Istraživanjem je utvrđena statistički značajna razlika u izražaju proteina flotilina, transferina i MBP-a u moždanom deblu miševa starih 5, 15 i 30 dana. Izmjerene koncentracije kolesterola pokazuju niske vrijednosti. Zaključak: Sastav lipidnih splavi moždanog debla miša mijenja se tijekom razvoja i diferencijacije što dobro prikazuju markeri flotilin i transferin.

flotilin ; transferin ; gangliozidi ; lipidne splavi ; MAG ; MBP ; mijelinizacija

nije evidentirano