Ciljana inaktivacija gena GFP u E. coli metodom CRISPR/Cas9 (CROSBI ID 433168)
Ocjenski rad | diplomski rad
Podaci o odgovornosti
Vuković, Mila
Jasna Puizina (mentor), Ivica Aviani (komentor)
hrvatski
Ciljana inaktivacija gena GFP u E. coli metodom CRISPR/Cas9
U radu je prikazana primjena metode CRISPR/Cas9 za ciljanu inaktivaciju gena koji kodira za zeleni fluorescentni protein (GFP) u bakteriji E. coli. Eksperiment je proveden tako da su se primjenom bioinformatičkih alata dizajnirale vodeće RNA molekule čiji su odgovarajući DNA oligonukleotidi uneseni u plazmid BPK764. Taj plazmid je specifičan po tome što sadrži gen za kaspazu Cas9 i insercijsko mjesto za unos molekule sgRNA. Drugi ključni plazmid je pGLO jer on sadrži gen GFP čija je inaktivacija cilj ovog rada. Uspješna inaktivacije gena GFP je provedena primjenom sustava CRISPR/Cas9 što je pokazano vizualizacijom kontrolnih i eksperimentalnih skupina bakterija na UV transiluminatoru. Bakterije obiju skupina snimljene su mikroskopom atomskih sila (AFM) primjenom kvantitativnog načina rada (QI) i invertnim optičkim mikroskopom s fluorescentnim filterom na kojem je također potvrđena uspješnost provedenog eksperimenta.
CRISPR/Cas9, ciljana inaktivacija gena, GFP, AFM, invertni optički mikroskop
nije evidentirano
engleski
Targeted inactivation of the GFP gene in E. coli by the CRISPR/Cas9 method
nije evidentirano
CRISPR, Cas9, gRNA, genetic engineering, AFM
nije evidentirano
Podaci o izdanju
68
22.10.2019.
obranjeno
https://repozitorij.pmfst.unist.hr/islandora/object/pmfst:812
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet u Splitu
Split
Povezanost rada
Biologija, Biotehnologija, Fizika, Interdisciplinarne prirodne znanosti