hrvatski

Challenges in the development and validation of the HPLC-DAD method for determining the content of a proposed fixed drug combination for the treatment of inflammatory bowel diseases

Kontrola kvalitete važan je korak u farmaceutskoj industriji kako bi se osigurala i potvrdila sigurnost farmaceutskih proizvoda. Tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti igra važnu ulogu u kontroli kvalitete aktivnih farmaceutskih komponenata i farmaceutskih proizvoda od njezine rane pojave. Razvojem novih analitičkih metoda pomiču se granice te metode postaju sofisticiranije a time se otežava njihov razvoj koji je kompleksan i dugotrajan. Folna kiselina (Vitamin B9) igra važnu ulogu u mnogim funkcijama u ljudskom tijelu. Osigurava normalan rad organizma, dok trudnice moraju uzimati folnu kiselinu kako bi se osigurao normalan razvoj ploda. Kako pacijenti koji boluju od upalnih bolesti crijeva, kronove bolesti (eng. Crohn's disease) ili ulceroznog kolitisa (eng. Ulcerative colitis), dokazano imaju manju koncentraciju folne kiseline u svom tijelu, potrebna je njegova nadoknada. Predložene fiksne kombinacije aminosalicilata i folne kiseline osigurale bi unos folne kiseline prilikom liječenja pacijenata sa upalom bolesti crijeva. Cilj rada bio je razviti jednu HPLC metodu koja bi se koristila u laboratorijima za kontrolu kvalitete za analizu sadržaja svih 4 predloženih kombinacija aminosalicilata (mesalazin, sulfasalazin, olsalazin i balsalazid) i folne kiseline. Velika razlika u koncentraciji komponenata u kombinacijama (do 750 puta) te razlika ali i sličnosti u fizikalno-kemijskim karakteristikama spojeva otežalo je razvoj metode ali ga je učinilo i zanimljivim. Prilikom razvoja metode ispitane su razne kolone, u kombinaciji s raznim mobilnim fazama, protocima, gradijentima, temperaturama. Također, ispitani su i razne metode detekcije (detektor s nizom dioda, fluorescentni detektor i maseni spektrometar). Metoda je razvijena na Agilent 1100 HPLC sustavu koristeći XBridge fenilnu kolonu (150 mm x 4.6 mm, 3.5 µm) sa gradijentnom eluacijom na 25°C pri protoku od 1 mL/min. Kao mobilna faza A koristila se 0.2% otopina mravlje kiseline u vodi te 0.2% otopina mravlje kiseline u metanolu kao mobilna faza B. Za detekciju je odabran detektor s nizom dioda kao najprikladniji a za praćenje apsorbancija uzete su valne duljine od 320 nm za praćenje sulfasalazina, olsalazina i balsalazida, 300 nm za mesalazin i 280 nm za folnu kiselinu. Metoda je validirana na linearnost, točnost, preciznost, granicu detekcije i kvantifikacije, robusnost i selektivnost prema ICH smjernicama. Metoda je ispitana na komercijalno dostupnim aminosalicilatima i folnoj kiselini te su svi dobiveni sadržaji u dozvoljenim granicama. Time je potvrđeno da je metoda primjerena za ciljanu primjenu.

upalne bolesti crijeva ; HPLC sadržaj, sminosalicilati, folna kiselina

nije evidentirano