hrvatski

Utjecaj egzogenog melatonina na biokemijske pokazatelje i antioksidacijski status sjemene plazme francuskih alpskih jarčeva izvan rasplodne sezone

Jedan od značajnijih čimbenika koji uvjetuju smanjenje pokretljivosti i sposobnosti oplodnje spermija su oksidativna oštećenja spermija koja nastaju kao posljedica djelovanja prekomjerne količine reaktivnih kisikovih spojeva (ROS). Prekomjerne količine ROS-a nastaju tijekom procesa manipulacije i krioprezervacije sjemena te prilikom upalnih stanja spolnih organa. Protutežu ROS-u u organizmu čine antioksidansi koji su prisutni u sjemenoj plazmi i spermijima. Nesrazmjer stvaranja slobodnih radikala i antioksidativne obrane organizma naziva se oksidativni stres koji može dovesti do oštećenja stanica i posljedično neplodnosti. Melatonin je molekula sa sposobnošću direktne i indirektne antioksidativne zaštite, sprječava lipidnu peroksidaciju u staničnim membranama, apoptozu spermija te štiti DNK-a i mitohondrije spermija od oštećenja koja mogu nastati zbog štetnog djelovanja ROS-a. Cilj ovog istraživanja bio je utvrditi utjecaj egzogenog melatonina na antioksidativnu zaštitu ejakulata jarčeva izvan rasplodne sezone praćenjem antioksidativne enzimske aktivnosti u sjemenu i različitih pokazatelja kvalitete ejakulata prije i poslije dubokog smrzavanja. U istraživanju je bilo uključeno 12 jarčeva pasmine francuska alpina starosti 1, 5-4 god. tijekom 6 pokusnih perioda (svaki period je trajao 2 tjedna) izvan rasplodne sezone. Jarčevi su nasumično bili podijeljeni u dvije skupine: kontrolna (n=6) i pokusna (n=6). Pokusnoj skupini jarčeva je krajem 2. perioda apliciran egzogeni melatonin (četiri implantata od 18 mg na bazu uške). Svim jarčevima se jedanput tjedno uzimao ejakulat pomoću umjetne vagine (ukupno 12 tjedana) u jutarnjim satima prilikom čega se procjenjivao libido. Ejakulatima se po uzimanju određivao volumen, koncentracija, pokretljivost, udio živih i abnormalnih spermija. U sjemenoj plazmi i spermijima su određene aktivnosti glutation reduktaze (GR), glutation peroksidaze (GSH-Px), superoksid dismutaze (SOD), katalaze (CAT) i koncentracija malondialdehida (MDA). Spermijima je nakon izdvajanja od sjemene plazme dodan komercijalni razrjeđivač s vitaminima E i C i bez vitamina te su kao takvi bili podvrgnuti procesu krioprezervacije. U smrznutom sjemenu su nakon otapanja određivani pokretljivost i brzinski parametri spermija pomoću kompjuterske analize spermija, udio oštećenja plazmatske i akrosomske membrane, oštećenja DNK i oštećenja i depolarizacije mitohondrija protočnom citometrijom te udio živih spermija i različitih oblika abnormalnosti citološko-morfološkom pretragom. U pokusnoj skupini jarčeva utvrđeno je neznačajno veća razina libida te značajno bolja pokretljivost spermija i udio živih spermija tijekom 3.–4. istraživanog perioda. Pokusna skupina jarčeva imala je značajno niže vrijednosti GR u spermijima i sjemenoj plazmi tijekom gotovo cijelog perioda istraživanja, značajno manju aktivnost GSH–Px u spermijima te veću u sjemenoj plazmi u zadnjem periodu istraživanja te značajno manju vrijednost SOD-a u spermijima tijekom zadnja tri perioda. Skupina jarčeva koja je primila melatonin imala je značajno veće vrijednosti omjera CAT/SOD, GSH–Px/SOD u sjemnoj plazmi i spermijima tijekom 6. perioda te značajno niže vrijednosti omjera GR/GSH–Px u spermijima tjekom 6. perioda i sjemenoj plazmi tijekom 5. istraživanog perioda. Pokusna skupina jarčeva imala je veću pokretljivost, progresivnu pokretljivost, udio živih i udio živih spermija s intaktnom akrosomom tijekom 3. perioda nakon otapanja sjemena. Isto tako, pokusna skupina je u 4. periodu istraživanja imala veću frekvenciju prelaska pravolinijske putanje u sekundi spermija u odnosu na kontrolnu skupinu. Prema dobivenim rezultatima može se zaključiti da egzogeni melatonin ima pozitivan učinak na pokretljivost i udio živih spermija u svježem i odmrznutom ejakulatu neposredno nakon aplikacije melatonina. Egzogeni melatonin utjecao je na promjenu aktivnosti pojedinih antioksidacijskih enzima u određenim periodima istraživanja, a ponajviše na GR u sjemenoj plazmi i spermijima ; SOD u spermijima te GSH-Px u sjemenoj plazmi i spermijima. Utvrđena je pozitivna korelacija CAT, GR, SOD u spermijima. Isto tako, egzogeni melatonin imao je značajan utjecaj i na omjere antioksidacijskih enzima u sjemenoj plazmi i spermijima u istom pokusnom periodu te bi se određivanje omjera u budućnosti moglo smatrati boljim pokazateljima oksidativnog stresa te dati bolji uvid u adaptaciju i stanje antioksidativnog sustava u odnosu na pojedinačno utvrđene aktivnosti antioksidativnih enzima. Po prvi puta je u spermijima jarčeva utvrđen atioksidativni status te je nađena pozitivna korelacija aktivnosti CAT, GR i SOD s oštećenjem DNK u spermijima.

Melatonin ; Ejakulat ; Antioksidativni enzimi ; Pokazatelji kvalitete ejakulata ; Jarčevi

nije evidentirano