hrvatski

Konstrukcija vektora za stvaranje transgeničnog miša s bioluminiscentnim i fluorescentnim neuronima

Genetički preinačene životinje nužni su modeli za razumijevanje ljudskih bolesti na razini cijelog organizma. Miš s bioluminiscentnim i fluorescentnim neuronima bio bi važan model za proučavanje oštećenja i obnove mozga. Transgenične životinje s bioluminiscentnim i fluorescentnim signalom mogu se koristiti za praćenje molekularnih procesa in vivo, a označene stanice se mogu izolirati i služiti kao model za istraživanja in vitro. U ovom radu je opisana konstrukcija vektora s transgeničnom kazetom koja sadrži mišji promotor teške podjedinice neurofilamenata (NFH, od engl. neurofilament heavy) te gen reporter s bioluminiscentnim i fluorescentnim svojstvima, TurboLuc. Ekspresija reporterskog proteina s konstruiranog plazmida zabilježena je u diferenciranim neuralnim matičnim stanicama. Navedeni plazmid je stoga korišten za dobivanje nove transgenične linije mikroinjekcijom u pronukleus oplođene jajne stanice. Nakon selekcije, nosioci transgena, budući osnivači transgeničnih mišjih linija, snimljeni su optički in vivo te je kod njih utvrđena prisutnost bioluminiscentnog signala. Daljnja karakterizacija novih transgeničnih linija ukazat će je li signal specifičan za terminalno diferencirane neurone. Ovakav mišji model bi bio pogodan za in vitro istraživanje diferencijacije neuralnih matičnih stanica, te in vivo, u praćenju matičnih stanica nakon transplantacije u oštećeno područje mozga.

neurofilamenti ; Nefh ; TurbLuc ; luciferaza ; Luc2 ; TurboFP635 ; neuralne matične stanice

nije evidentirano