hrvatski

Određivanje antioksidativne aktivnosti beta- blokatora HPLC-DPPH metodom

Kardiovaskularne bolesti imaju najveću prevalenciju i komorbiditete te najveći mortalitet u općoj populaciji. Dobro poznavanje patofizioloških mehanizama nastanka u kombinaciji s razumijevanjem farmakoloških učinaka dostupnih lijekova temelj je uspješnog liječenja. Beta- blokatori su nezamjenjivi lijekovi u indikacijama poput hipertenzije, angine pektoris, akutnog infarkta miokarda, sekundarne prevencije infarkta miokarda, srčane aritmije i zatajenja srca. Iako svi beta- blokatori dijele zajednički osnovni mehanizam djelovanja, među njima postoje određene razlike, kako u farmakokinetičkim i farmakodinamičkim svojstvima, tako i u dodatnim mehanizmima djelovanja. Upravo te razlike mogu izdvojiti jedan ili više lijekova kao lijekove izbora u odnosu na ostale pripadnike skupine, pogotovo u osoba s komorbiditetima. Cilj ovog rada bio je ispitati antioksidativni učinak beta-blokatora (atenolola, bisoprolola, karvedilola, nebivolola i propranolola) mjereći njihovu sposobnost hvatanja slobodnog 1, 1-difenil-2-pikrilhidrazil radikala (DPPH•). Korištena DPPH metoda temelji se na sposobnosti hvatanja slobodnog radikala potencijalnim antioksidansom (beta-blokatorom) pri čemu dolazi do smanjenja apsorbancije DPPH•. Analize su provedene tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti (engl. high performance liquid chromatography, HPLC). Korištena je Xbridge C18 kolona (dimenzije 4, 6 mm × 150 mm, veličina čestica 3, 5 μm) uz izokratnu eluaciju korištenjem mobilne faze sastava metanol : ultra-čista voda (80:20, V/V). Brzina protoka mobilne faze bila je 1, 0 mL/min, temperatura kolone kontrolirana na 25 °C, a volumen injektiranja uzoraka iznosioje 20 μL. Kromatogrami su snimani detektorom s nizom dioda (engl. diode array detector, DAD) na valnoj duljini od 517 nm. Vrijeme zadržavanja DPPH• na koloni iznosilo je 3, 83 min, dok je ukupno trajanje analize iznosilo 4, 5 min. Svi uzorci pripremljeni su kao 1 mM otopine i analizirani u triplikatu, a rezultati izraženi kao antioksidativni kapacitet ekvivalentan standardu TROLOX-a. Na temelju dobivenih rezultata mjerljivu antioksidativnu aktivnost pokazali su atenolol i karvedilol. HPLC-DPPH metoda pokazala se brzom i učinkovitom za određivanje antioksidativne aktivnosti beta-blokatora s ciljem ispitivanja dodatnih mehanizama djelovanja pojedinih predstavnika ove široko primjenjivane skupine lijekova u kliničkoj praksi.

beta-blokatori, antioksidativna aktivnost, HPLC-DPPH metoda

nije evidentirano