hrvatski

Analitička validacija kvantitativne imunokemijske metode za određivanje antigena proteina C na uređaju mini VIDAS

Uvod: Cilj ovog rada bio je analitička validacija kvantitativne metode određivanja antigena proteina C (PC:Ag) u plazmi automatiziranom enzimunokemijskom metodom s fluorescentnom detekcijom na uređaju mini VIDAS (bioMérieux, Francuska). Materijali i metode: Analitička validacija provedena je prema postupniku za verifikaciju laboratorijskih metoda EP15-A2 (CLSI), a uključila je provjeru preciznosti u seriji (ponovljivost) i iz dana u dan (međupreciznost), točnosti, mjerne nesigurnosti, linearnosti i referentnog intervala. Za provjeru preciznosti analiziran je komercijalni kontrolni uzorak C1 (patološka razina) te sekundarni koagulacijski standard SSC/ISTH Lot #3 (normalna razina) u triplikatu kroz pet dana, a dobiveni podatci korišteni su i za izračun točnosti. Provjera linearnosti provedena je analizom pet razrjeđenja uzorka bolesnika s vrijednošću PC:Ag iznad gornje granice linearnosti, dok je referentni interval verificiran ispitivanjem 20 uzoraka ispitanika populacije za koju će se primijenjivati. Rezultati: Ispitivanjem ponovljivosti koeficijent varijacije (CV) za kontrolni uzorak C1 iznosio je 1, 7%, a za SSC/ISTH standard 2, 1%, što zadovoljava kriterije proizvođača (1, 9 – 3, 5%), dok su za međupreciznost dobiveni CV iznosili 1, 8% za kontrolni uzorak C1 te 1, 2% za standard SSC/ISTH, čime je dobiven znatno niži CV od proizvođača (3, 6 – 4, 8%). Provjerom točnosti dobiveno je odstupanje od očekivane vrijednosti od 3, 2% za kontrolni uzorak C1 te - 2, 5% za standard SSC/ISTH. Mjerna nesigurnost iznosila je 5, 8%. Ispitivanjem linearnosti potvrđena je linearnost koju je definirao proizvođač (1 – 120%). Provjerom referentnog intervala svi ispitanici imali su vrijednosti unutar očekivanoga raspona, čime se zadovoljavaju kriteriji prihvatljivosti (> 90%) te se referentni interval prihvaća (65 –145%). Zaključak: Validacija metode za određivanje PC:Ag na uređaju mini VIDAS u potpunosti je ispunila analitičke kriterije prihvatljivosti te se pokazala pogodnom za primjenu u rutinskom radu.

koagulacija, protein C antigen, validacija

nije evidentirano

engleski

Analytical validation of the quantitative immunoassay for protein C antigen determination on the mini VIDAS instrument

Uvod: Cilj ovog rada bio je analitička validacija kvantitativne metode određivanja antigena proteina C (PC:Ag) u plazmi automatiziranom enzimunokemijskom metodom s fluorescentnom detekcijom na uređaju mini VIDAS (bioMérieux, Francuska). Materijali i metode: Analitička validacija provedena je prema postupniku za verifikaciju laboratorijskih metoda EP15-A2 (CLSI), a uključila je provjeru preciznosti u seriji (ponovljivost) i iz dana u dan (međupreciznost), točnosti, mjerne nesigurnosti, linearnosti i referentnog intervala. Za provjeru preciznosti analiziran je komercijalni kontrolni uzorak C1 (patološka razina) te sekundarni koagulacijski standard SSC/ISTH Lot #3 (normalna razina) u triplikatu kroz pet dana, a dobiveni podatci korišteni su i za izračun točnosti. Provjera linearnosti provedena je analizom pet razrjeđenja uzorka bolesnika s vrijednošću PC:Ag iznad gornje granice linearnosti, dok je referentni interval verificiran ispitivanjem 20 uzoraka ispitanika populacije za koju će se primijenjivati. Rezultati: Ispitivanjem ponovljivosti koeficijent varijacije (CV) za kontrolni uzorak C1 iznosio je 1, 7%, a za SSC/ISTH standard 2, 1%, što zadovoljava kriterije proizvođača (1, 9 – 3, 5%), dok su za međupreciznost dobiveni CV iznosili 1, 8% za kontrolni uzorak C1 te 1, 2% za standard SSC/ISTH, čime je dobiven znatno niži CV od proizvođača (3, 6 – 4, 8%). Provjerom točnosti dobiveno je odstupanje od očekivane vrijednosti od 3, 2% za kontrolni uzorak C1 te - 2, 5% za standard SSC/ISTH. Mjerna nesigurnost iznosila je 5, 8%. Ispitivanjem linearnosti potvrđena je linearnost koju je definirao proizvođač (1 – 120%). Provjerom referentnog intervala svi ispitanici imali su vrijednosti unutar očekivanoga raspona, čime se zadovoljavaju kriteriji prihvatljivosti (> 90%) te se referentni interval prihvaća (65 –145%). Zaključak: Validacija metode za određivanje PC:Ag na uređaju mini VIDAS u potpunosti je ispunila analitičke kriterije prihvatljivosti te se pokazala pogodnom za primjenu u rutinskom radu.

coagulation, protein C antigen, validation

nije evidentirano